استاندارد کردن PCR تشخیصی به وسیله اینترنال کنترل تکثیری
نویسندگان
چکیده مقاله:
مقدمه: بروز نتایج متفاوت در آزمایشگاهها به علت استاندارد نبودن، از معایب روشهای تکثیر مولکولی است. در بیشتر مقالات چاپ شده در زمینه تشخیص PCR عوامل عفونی، اینترنال کنترل تکثیری (IC) وجود ندارد. هدف از پژوهش حاضر، طراحی و توسعه یک روش ساده و سریع، برای ساخت اینترنال کنترل آزمون PCR در آزمایشگاههای تشخیصی است. مواد و روش ها: در پژوهش حاضر، برای ساخت اینترنال کنترل رقابتی، از پرایمرهای مرکب و روش PCR-Cloning استفاده شد. بدین ترتیب که پرایمرهای جلویی و عقبی تشخیص PCR ویروس هپاتیت) (HBV، ویروس هرپس سیمپلکس HSV))، مایکوباکتریوم توبرکلوزیس (MTB)، مایکوپلاسما پنومونیه (Mpn)، کریپتوکوکوس نئوفورمنس (Cne)، جنس سالمونلا (Sal. sp) و جنس مایکوپلاسما (M. sp) را در بخش '5 پرایمرهای ژن کینتوپلاست لیشمانیا، به شکل دم طراحی و سنتز شد. اینترنال کنترلهای تکثیری با پلاسمید pTZ57R الحاق و در باکتری اشریشیاکلی JM107 ترانسفورم شد. تعداد حداقل IC در هر واکنش PCR از طریق رقیقسازی و همینطور طیف پاسخ PCR همراه با IC بررسی شد. نتایج: HBV–HSV–MTB–MPN–Cne–Sal. sp– و M. sp با پرایمرهای اختصاصی به ترتیب برابر با 272bp-284bp-415bp-345bp-245bp-454bp-262bp و محصول اینترنال کنترل هم به ترتیب 672bp-668bp-661bp-669bp-660bp-662bp-660bp جفت باز بود، که از نظر اندازه، اختلاف مطلوبی بین محصول PCR و IC وجود دارد و به آسانی در ژل قابل تفکیک است. تعداد حداقل IC در هر واکنش، 1000 عدد تعیین شد. حداقل و حداکثر حساسیت آزمون PCR همراه با IC برای همه عوامل در حد مطلوبی به دست آمد. در آزمون ویژگی با عوامل مختلف هم، هیچ محصول ناخواستهای مشاهده نشد. بحث و نتیجه گیری: نتایج منفی و مثبت کاذب که به علتهای مختلف در روش PCR رخ میدهد از مشکلات مهم این روش جذاب است. استفاده از یک اینترنال کنترل در تشخیص مولکولی به عنوان کنترل داخلی، میتواند این خطاها را شناسایی کند.
منابع مشابه
استاندارد کردن pcr تشخیصی به وسیله اینترنال کنترل تکثیری
مقدمه: بروز نتایج متفاوت در آزمایشگاهها به علت استاندارد نبودن، از معایب روشهای تکثیر مولکولی است. در بیشتر مقالات چاپ شده در زمینه تشخیص pcr عوامل عفونی، اینترنال کنترل تکثیری (ic) وجود ندارد. هدف از پژوهش حاضر، طراحی و توسعه یک روش ساده و سریع، برای ساخت اینترنال کنترل آزمون pcr در آزمایشگاههای تشخیصی است. مواد و روشها: در پژوهش حاضر، برای ساخت اینترنال کنترل رقابتی، از پ...
متن کاملساخت اینترنال کنترل تشخیص مولکولی ویروس هپاتیت B به روش PCR-Cloning
سابقه و هدف: در تشخیص هپاتیت ناشی از ویروس هپاتیت B (HBV )، بکارگیری تکنیک های آزمایشگاهی حساس و اختصاصی همچون PCR ضروری است. روشهای سرولوژیکی موجود، قابلیت تشخیص سریع و دقیق آلودگی را نداشته درحالیکه روشهای نوین مولکولی مانند PCR ابزار کارآمدی برای ارزیابی میزان شیوع HBV می باشد. بروز نتایج متفاوت در آزمایشگاهها بدلیل استاندارد نبودن از معایب این تکنیک مولکولی قوی است. یکی از مهم ترین موانع در...
متن کاملازدیاد وتکثیر ژن invA سالمونلا به وسیله PCR بعنوان یک روش تشخیصی این باکتریها
هدف: تعیین ژن تهاجم سالمونلاها با روش PCR طرح: مطالعه آزمایشگاهی روش: تعداد 60 نمونه سالمونلای جداشده از منابع مختلف انسانی و دامی ابتدا با آزمایشات بیوشیمیایی‘ مورد تایید قرار گرفتند . و سپس گروه سرمی این نمونه ها به وسیله آنتی سرم های پلی والان ومونو والان تشخیص معین گردید. برای استخراج DNA آنها از روش جوشاندن استفاده گردید. از دو پرایمر اختصاصی S139 و S141 مطابق برنامه خاصی برای تکثیر ژن...
متن کاملساخت اینترنال کنترل تشخیص مولکولی ویروس هپاتیت b به روش pcr-cloning
سابقه و هدف: در تشخیص هپاتیت ناشی از ویروس هپاتیت b (hbv )، بکارگیری تکنیک های آزمایشگاهی حساس و اختصاصی همچون pcr ضروری است. روشهای سرولوژیکی موجود، قابلیت تشخیص سریع و دقیق آلودگی را نداشته درحالیکه روشهای نوین مولکولی مانند pcr ابزار کارآمدی برای ارزیابی میزان شیوع hbv می باشد. بروز نتایج متفاوت در آزمایشگاهها بدلیل استاندارد نبودن از معایب این تکنیک مولکولی قوی است. یکی از مهم ترین موانع در...
متن کاملازدیاد وتکثیر ژن inva سالمونلا به وسیله pcr بعنوان یک روش تشخیصی این باکتریها
هدف: تعیین ژن تهاجم سالمونلاها با روش pcr طرح: مطالعه آزمایشگاهی روش: تعداد 60 نمونه سالمونلای جداشده از منابع مختلف انسانی و دامی ابتدا با آزمایشات بیوشیمیایی‘ مورد تایید قرار گرفتند . و سپس گروه سرمی این نمونه ها به وسیله آنتی سرم های پلی والان ومونو والان تشخیص معین گردید. برای استخراج dna آنها از روش جوشاندن استفاده گردید. از دو پرایمر اختصاصی s139 و s141 مطابق برنامه خاصی برای تکثیر ژن ...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 4 شماره 15
صفحات -
تاریخ انتشار 2018-04-04
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023